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Uni?Insulin胰島素專用硅膠反相填料

瀏覽次數: 日期:2018-09-28 09:16:07

       胰島素是胰腺中胰島β細胞分泌的一種雙鏈形式(A鏈,B鏈)的多肽激素,由多個氨基酸組成,分子量5000 Da以上。不同物種胰島素功能大體相同,而且結構類似,只是氨基酸序列同源性略有差異。目前胰島素純化絕大多數采用進口介質,對生產成本有著很大的制約。納微科技經過十年創新研究,推出基于PS-DVB、PMMA和Silica基質的不同類型的胰島素純化色譜填料,特別是選擇了納微科技自主專利技術生產的單分散多孔硅膠為基質,利用先進的表面鍵合和封端技術開發的Uni®Insulin C8 系列產品,具有機械強度高、分辨率好、收率高,并且具有超強的耐堿性(pH范圍2~12),可替代進口C8填料用于胰島素產品的精純。

       下面就介紹由納微科技最新開發的Uni®Insulin胰島素專用硅膠反相填料純化重組人胰島素和德谷胰島素的效果吧。

 

Uni®Insulin胰島素專用硅膠反相填料
                             ——重組人胰島素純化


 

       上圖是納微科技根據胰島素結構特點,對硅膠的孔道結構進行了優化,并對鍵合方式做了特別處理,做出的胰島素專用硅膠反相填料,相比進口填料K公司C8,Uni®InsulinC8,收率得到較大提高,提升了胰島素的制備效率。

 

 

粗品和終產品分析譜圖

 

 

Uni®Insulin胰島素專用硅膠反相填料
                         ——德谷胰島素純化方案

 

 

       由上圖可以看出,在12.5mg/g(7.5g/L)的載量下,采用K 公司C8 填料最終的收集純度為99.01%,主要雜質為3個,其收率為67.0%。同樣采用Uni®Insulin C8填料其收集純度為99.07%,主要雜質為2個,其收率為70.8%。綜合比較,采用Uni®Insulin C8填料稍優。

 

 

 

 

粒徑分布與渦流擴散關系圖

 

Uni®Insulin C8 和K C8 10-100 堿洗對比

 

       納微科技采用獨特的硅膠表面有機處理技術所制備的Uni®Insulin胰島素專用硅膠反相填料(pH 2~12),通過有機薄層掩蓋硅膠表面殘余的金屬雜質,減小色譜分離過程中的不良影響,大大提高了堿性條件下的使用壽命,降低胰島素的純化成本。

 

 

 

pH13.0堿沖洗次數對甲苯色譜峰影響對比試驗
堿洗條件: MeOH / NaOH (pH=13.0) = 40 / 60
沖洗體積: 60 CV
柱效測試:  流動相:ACN / H2O = 60 / 40
柱溫:35 ℃
樣品:甲苯

 

Uni®Insulin胰島素專用硅膠反相填料

 

1. Uni®Insulin胰島素專用硅膠反相填料在不同的載量下,峰形及出峰時間都比較穩定,重現性較好;
2.針對不同純度和雜質的重組人胰島素和德谷胰島素樣品, Uni®Insulin胰島素專用硅膠反相填料與K公司填料整體無明顯差異,兩者都可以收集到滿足要求的合格樣品,并且在某些條件下Uni®Insulin胰島素專用硅膠反相填料收率表現比K公司略優,提高了胰島素純化效率;
3. Uni®Insulin胰島素專用硅膠反相填料可以耐受較高pH的堿洗,并保持柱效和峰型正常,降低胰島素純化成本。

 

 

胰島素專用硅膠填料適用于以下胰島素品種及其類似物

重組人胰島素
甘精胰島素
地特胰島素
門冬胰島素
德谷胰島素
賴脯胰島素

 

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